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化學(xué)性質(zhì)

中文名稱:過氧化氫酶
中文同義詞:過氧化氫酶;CATALASEFROMBOVINELIVER品牌;過氧化氫酶(已過濾);過氧化氫酶(懸浮液);過氧化氫酶,來源于牛肝臟,2000-5000UNITS/MG;過氧化氫酶(凍干粉);過氧化氫酶制劑;CATALASE來源于人類紅細(xì)胞
英文名稱:CATALASE
英文同義詞:equilase;Catalase-Agarose;H2O2oxidoreductase;CatalasefromA.niger,lyophil.;Catalasefrombovineliver,lyophil.;Catalase-peroxidase;CATALASEFROMBOVINELIVERCA.65000U/MGPROTEINSUSPENSION;CATALASEFROMASPERGILLUSNIGERCA.2000U/MGLYOPH.SALT-FREE
CAS號(hào):9001-05-2
分子式:C9H10O3
分子量:166.1739

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EINECS號(hào):232-577-1
過氧化氫酶性質(zhì)
密度1.06g/mLat20°C
閃點(diǎn)41°C
儲(chǔ)存條件2-8°C
形態(tài)suspension
顏色deepbrown
敏感性HygroscopicMerck13,1910
穩(wěn)定性Airandmoisturesensitive.Incompatiblewithstrongoxidizingagents.Refrigerate.

背景及概述
過氧化氫酶是一種催化過氧化氫分子分解的酶。2H2O2—→2H2O+O2系統(tǒng)名為H2O2;H2O2氧化還原酶(E、C、1、11、1、6),它的輔基為血紅素,分子量為250,000,以四聚體存在。幾乎所有動(dòng)物細(xì)胞中都存在過氧化氫酶,除真性厭氧菌外,在植物中及所有微生物中廣泛存在這種酶。動(dòng)物肝臟、紅細(xì)胞、腎臟含有特別豐富的過氧化氫酶,主要存在于細(xì)胞的微體(又叫過氧化酶體)中。在線粒體的呼吸鏈,黃素酶反應(yīng)及其他氧化反應(yīng)中的電子傳遞中,都會(huì)或可能會(huì)生成一部分有毒性的氧化還原反應(yīng)產(chǎn)物,最主要的是超氧離子O2-及H2O2,它們?cè)诨瘜W(xué)性質(zhì)上都非?;顫?,可能不可逆地?fù)p害某些生物分子,超氧化離子在細(xì)胞內(nèi)的超氧物歧化酶的作用下,變成過氧化氫和氧。過氧過氫酶最主要的作用,就是分解過氧化氫,防止過氧化氫的蓄積,使細(xì)胞免受過氧化氫之害,過氧化氫酶催化過氧化氫分解速度十分迅速,比過氧化物酶快104倍,每分子酶每秒鐘能催化分解44000分子的過氧化氫。由于我國(guó)境內(nèi)分布著各種類型的天然極端環(huán)境,擁有豐富的極端微生物資源,加大力度開發(fā)各類極端微生物的過氧化氫酶,并不斷提高產(chǎn)酶水平,有望改變我國(guó)對(duì)過氧化氫酶依賴進(jìn)口的局面。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)以及生物信息學(xué)的不斷發(fā)展,將使得在體外對(duì)極端酶進(jìn)行修飾和改造成為可能,極端微生物產(chǎn)CAT的開發(fā)和應(yīng)用必將呈現(xiàn)更加誘人的前景。

藥品概況
通用名稱:過氧化氫酶
英文名稱:CATALASE FROM MICROCOCCUS
別名:自溶血性鏈球菌分離的過氧化氫酶 
Cas No:9001-05-2

臨床意義
CAT具有各種生理功能,它既可調(diào)節(jié)體內(nèi)H2O2水平,又可充當(dāng)Hb和其他含巰基蛋白質(zhì)的保護(hù)劑。血清CAT活性改變可見于下列疾?。篊AT增高主要見于肝硬化、傷寒、發(fā)熱等。CAT減低主要見于各類癌癥、心肌炎、肺炎、急性膽囊炎、急性胰腺炎等。饑餓、風(fēng)濕熱、外傷、局部化膿性感染、貧血等血清CAT也可呈不同程度地減低。

來源
幾乎所有的生物機(jī)體都存在過氧化氫酶。其普遍存在于能呼吸的生物體內(nèi),主要存在于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中,其酶促活性為機(jī)體提供了抗氧化防御機(jī)理。CAT是紅血素酶,不同的來源有不同的結(jié)構(gòu)。在不同的組織中其活性水平高低不同。過氧化氫在肝臟中分解速度比在腦或心臟等器官快,就是因?yàn)楦沃械腃AT含量水平高。

反應(yīng)機(jī)制

雖然過氧化氫酶完整的催化機(jī)制還沒有完全被了解,但其催化過程被認(rèn)為分為兩步:

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其中,“Fe()-E”表示結(jié)合在酶上的血紅素基團(tuán)(E)的中心鐵原子(Fe)。Fe(IV)-E(.+)為Fe(V)-E的一種共振形式,即鐵原子并沒有完全氧化到+V價(jià),而是從血紅素上接受了一些“支持電子”。因而,反應(yīng)式中的血紅素也就表示為自由基陽離子(.+).過氧化氫進(jìn)入活性位點(diǎn)并與酶147位上的天冬酰胺殘基(Asn147)和74位上的組氨酸殘基(His74)相互作用,使得一個(gè)質(zhì)子在氧原子間互相傳遞。自由的氧原子配位結(jié)合,生成水分子和Fe(IV)=O。Fe(IChemicalbookV)=O與第二個(gè)過氧化氫分子反應(yīng)重新形成Fe(III)-E,并生成水分子和氧氣,活性中心鐵原子的反應(yīng)活性可能由于357位上酪氨酸殘基(Tyr357)的苯酚基側(cè)鏈的存在(幫助Fe(III)氧化為Fe(IV))而得以提高。反應(yīng)的效率可能是通過His74和Asn147與反應(yīng)中間體作用而得以提高。該反應(yīng)的速率通??梢酝ㄟ^米氏方程來確定。過氧化氫酶也能夠氧化其他一些細(xì)胞毒性物質(zhì),如甲醛、甲酸、苯酚和乙醇。這些氧化過程需要利用過氧化氫通過以下反應(yīng)來完成:

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同樣,具體的反應(yīng)機(jī)制還不清楚。任何重金屬離子(如硫酸銅中的銅離子)可以作為過氧化氫酶的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。另外,劇毒性的氰化物是過氧化氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,可以緊密地結(jié)合到酶中的血紅素上,阻止酶的催化反應(yīng)。處于過氧化狀態(tài)的過氧化氫酶中間體的三維結(jié)構(gòu)已經(jīng)獲得解析,可以在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索到。

檢測(cè)
進(jìn)行中的過氧化氫酶檢測(cè),可以觀察到氣泡。過氧化氫酶檢測(cè)是微生物學(xué)家鑒定細(xì)菌種類的主要的三種檢測(cè)手段之一,即用過氧化氫來檢測(cè)過氧化氫酶是否存在。假如細(xì)菌中含有過氧化氫酶,則在過氧化氫溶液中加入少量細(xì)菌提取物就能觀察到氧氣氣泡生成。有氣泡生成,則該菌被認(rèn)為是呈“過氧化氫酶陽性”。如staphChemicalbookylococcus和micrococcus。沒有,則該菌被認(rèn)為是呈“過氧化氫酶陰性”。如streptococcus和enterococcus。雖然過氧化氫酶檢測(cè)無法鑒定特定生物體,但與其他檢測(cè)方法結(jié)合,它可以有效地幫助診斷。此外細(xì)菌中是否存在過氧化氫酶,還取決于細(xì)胞生長(zhǎng)條件和所使用的培養(yǎng)基。

功能概述
過氧化氫是一種代謝過程中產(chǎn)生的廢物,它能夠?qū)C(jī)體造成損害。為了避免這種損害,過氧化氫必須被快速地轉(zhuǎn)化為其他無害或毒性較小的物質(zhì)。而過氧化氫酶就是常常被細(xì)胞用來催化過氧化氫分解的工具。但過氧化氫酶真正的生物學(xué)重要性并不是如此簡(jiǎn)單:研究者發(fā)現(xiàn)基因工程改造后的過氧化氫酶缺失的小鼠依然為正常表現(xiàn)型,這就表明過氧化氫酶只是在一些特定條件下才對(duì)動(dòng)物是必不可少的。一些人群體內(nèi)的過氧化氫酶水平非常低,但也不顯示出明顯的病理反應(yīng)。這很有可能是因?yàn)檎2溉閯?dòng)物細(xì)胞內(nèi)主要的過氧化氫清除劑是過氧化物還原酶(peroxiredoxin),而不是過氧化氫酶。過氧化氫酶通常定位于一種被稱為過氧化物酶體Chemicalbook的細(xì)胞器中。植物細(xì)胞中的過氧化物酶體參與了光呼吸(利用氧氣并生成二氧化碳)和共生性氮固定(將氮?dú)?N2)解離為活性氮原子)。但細(xì)胞被病原體感染時(shí),過氧化氫可以被用作一種有效的抗微生物試劑。部分病原體,如結(jié)核桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌和空腸彎曲菌,能夠生產(chǎn)過氧化氫酶以降解過氧化氫,使得它們能在宿主體內(nèi)存活。漂白作用要說明的是用酶可促進(jìn)漂白的進(jìn)行,羊毛在含有蛋白酶BactosolST的過氧化氫漂液中漂白,可顯著提高羊毛的白度和親水性。這是由于酶促進(jìn)羊毛纖維初始受到快速的浸蝕,致使羊毛漂白較易進(jìn)行。從此原理出發(fā),將蛋白酶對(duì)羊毛先預(yù)處理,使纖維表面裸露,再進(jìn)行漂白,顯然效果更好,且纖維損傷也易控制。

分布
過氧化氫酶存在于所有已知的動(dòng)物的各個(gè)組織中,特別在肝臟中以高濃度存在。在投彈手甲蟲(bombardierbeetle)中,過氧化氫酶具有獨(dú)特用途。這種甲蟲具有兩套分開儲(chǔ)存于腺體中的化學(xué)物。大的腺體中儲(chǔ)存著對(duì)苯二酚和過氧化氫,而小的腺體中儲(chǔ)存著過氧化氫酶和辣根過氧化物酶。當(dāng)甲蟲將兩個(gè)腺體中的化學(xué)物質(zhì)混合在一起時(shí),就會(huì)釋放出氧氣,而氧氣既可以氧化對(duì)苯二酚又可以作為助推劑。過氧化氫酶也普遍存在于植物中,但不包括真菌,雖然有些真菌被發(fā)現(xiàn)在低pH值和溫暖的環(huán)境下能夠產(chǎn)生該酶。絕大多數(shù)需氧微生物都含有過氧化氫酶[4]。例外包括Streptococcus,一種沒有過氧化氫酶的需氧細(xì)菌。部分厭氧微生物,如Methanosarcinabarkeri,也含有過氧化氫酶。

毒性
FAO/WHO2001年規(guī)定由牛肝制得者,ADI不作限制性規(guī)定;溶纖維蛋白小球菌和黑曲霉制得者,AChemicalbookDI延期決定;由青霉制得者未作規(guī)定;由李氏木霉(Trichodermareesei)制得者不作特殊規(guī)定。

使用限量

適度為限(FDA,§173.135,2000)。

食品添加劑最大允許使用量最大允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)

添加劑中文名稱  允許使用該種添加劑的食品中文名稱    添加劑功能最大允許使用量(g/kg)最大允許殘留量(g/kg)

過氧化氫酶         食品                                                        酶制劑按生產(chǎn)需要適量使用(有特別規(guī)定的除外)

化學(xué)性質(zhì)
近乎白色至淺棕黃色的無定形粉末或液體。分子量約24萬。溶于水,水溶液一般呈淺棕黃色至棕色,幾乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚。最適pH值7.0,在稀酸中作用受阻。最適溫度0~10℃,溫度過高或過氧化氫濃度過大均能破壞其活性。1分子的過氧化氫酶在1min內(nèi)約可使500萬個(gè)Chemicalbook過氧化氫分子破壞。主要作用原理為:由肝臟所得者的最適pH值為7.0左右,在5.3~8.0之間活性都很高,5.0以下則很快下降。由黑曲菌所得者pH值在2~7之間均很活躍,而由小球菌制得者的最適pH值為7~9。天然品存在于好氣性微生物、哺乳動(dòng)物的紅血球、肝臟(極豐富)等中。

類別 有毒物質(zhì)
可燃性危險(xiǎn)特性 熱分解排出辛辣刺激煙霧
儲(chǔ)運(yùn)特性 庫(kù)房低溫通風(fēng)干燥
滅火劑 水,二氧化碳, 泡沫, 干粉

 

安全信息

危險(xiǎn)品標(biāo)志 B
危險(xiǎn)類別碼 10
安全說明 23-24/25-22
危險(xiǎn)品運(yùn)輸編號(hào) UN 1993 3/PG 3
WGK Germany 1
RTECS號(hào)FI4378000
F 10-21
TSCA Yes
海關(guān)編碼 35079090

合成方法

以牛肝為原料,在35%二氧六環(huán)中勻漿,過濾后用二氧六環(huán)沉淀,飽和硫酸銨結(jié)晶得產(chǎn)品。

上下游產(chǎn)品信息

表征圖譜

相關(guān)文獻(xiàn)

用途

  1. 酶制劑。主要用于干酪、牛奶和蛋制品等的生產(chǎn),以消除由紫外線照射時(shí)產(chǎn)生過氧化氫而造成的特異臭味;亦可用作面包制造時(shí)的疏松劑。在牛奶中的最高用量為20mg/kg。

  2. 常用診斷用酶。配合偶聯(lián)反應(yīng),測(cè)定葡萄糖等。食物防腐、分解過氧化氫。生化試劑。

  3. 用于生化研究、食物防腐,牛奶的殺菌脫糖等。臨床上常用作診斷酶,測(cè)定葡萄糖含量。

  4. 一種氧化還原酶,可將過氧化氫氧化為氧,與此同時(shí)將另一分子過氧化氫還原為水。作為天然抗氧化劑,可用于研究活性氧物質(zhì)對(duì)基因表達(dá)和凋亡的作用。它還被用于保護(hù)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸免受氧化損傷。